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了解IVC系統和超淨工作台的操作過程實驗詳解
发布时间:2012-01-10 08:53:58   浏览:6139

了解IVC系統和超淨工作台的操作過程實驗詳解

 

通過對IVC系統實驗,了解超淨工作台的使用原理及操作過程,所謂實踐出真知,只有通過這樣才能增長學生們的見識及學習能力。

【目的與要求】

了解IVC系統和超淨工作台的原理結構、維護、操作程序和注意事項。

 

【儀器與材料】

IVC、超淨工作台、一次性手套、口罩。

 

【步驟】

一、师讲述IVC系统和超淨工作台的原理結構、維護、操作程序和注意事項。

二、學生在教師指導下進行各項基本操作。

 

【內容】

一、原理和結構

IVC籠盒由耐高溫(至少能耐150~160℃高溫以上)的透明塑料材料制成,一套籠盒由上蓋、底盒、食槽、水槽、鎖緊扣、進出風口組件、矽橡膠密封墊圈等組成有的上蓋上還有一個稱之爲生命之窗的空氣過濾網。獨立通風籠盒是IVC設備的關鍵所在,它要具有一定的密閉性,能防止盒外空氣的進入,以減少可能的感染來源,又要能讓潔淨空氣流暢進入,並在盒內形成良好的氣流動或擴散,與盒內氣體混合並把籠盒內的廢氣排出。籠盒一般有兩種基本形式,而且大多申請了專利保護。一種爲籠盒的通排氣是閥門開閉式,即上架時打開,取下時自動關閉。閥門有照相機快門式和單片彈簧開關式等。另一種爲盒內終端過濾保護式。過濾膜的形式有圓筒狀和平板狀兩種。過濾膜大多爲亞高效或高效過濾材料制成。

 

二、操作程序

1.IVC操作使用前的准備工作

  (1)开启超淨工作台风机,净化台内环境。打开工作灯达到工作照度。

  (2)檢查超淨工台中准備的各種滅菌飼養和實驗物品(飼料、墊料、酸化水及實驗用物)是否齊全。若需更換籠盒。檢查滅菌籠盒准備情況,並用不鏽鋼推車移至超淨台移門邊。

  (3)檢查噴霧器噴灑效果及超淨台內外擦抹用的藥液是否已配置好。

  (4)打開房間內排風系統。排除打開籠盒時逸出的有味氣體。

  (5)檢查IVC機組各種表頭指針及目視各籠盒內的動物情況,估測IVC運行情況。

  (6)記錄影響實驗動物繁殖、生長、發育的主要環境參數,如溫度、相對濕度、日溫差、籠盒內外壓差等。

 

2.IVC操作使用程序及規範

  (1)人員帶好一次性口罩、帽子及醫用乳膠手套。(注意:帶手套前應洗淨手及指甲,若指甲太長應適當修剪,以免戳破醫用乳膠手套)。

  (2)用双手轻轻抬起IVC笼盒外端,沿笼架搁挡向外移出笼盒,放在超淨工作台旁的不锈钢小推车上。

  (3)用藥液噴霧器充分噴灑雙手手套外表及IVC籠盒的外面,消毒滅菌並沾粘住表面的塵埃,防止進入超淨台時被層流氣體吹揚。也可用帶手套的雙手浸入藥液容器中,撈起並擰幹藥液毛巾,擦幹手套外液滴,同時擦一下籠盒的外表。

  (4)打开超淨工作台移门(高度只要能使笼盒进入即可),把笼盒移入超淨工作台。

  (5)适当拉下超淨工作台移门(高度只要操作者二手在台中活动自如即可)。打开IVC笼盒盖底之间的紧固扣并打开笼盖。侧卧放在一边。 

(6)目視籠盒中動物的生活情況,作出添料、加水、換盒、幼仔斷乳分窩及動物實驗的決定,並實施:

 

①添加飼料:齧齒類動物爲自由采食(因實驗需要,限量供給除外),采食時間大多在夜晚,白天目視盒中應富余供給。添加時,用小剪刀剪開輻照料鋁泊包裝,加滿料鬥即可,根據動物的數量,一般加一次料可維持三天左右。

 

②添加饮用水:水是动物生存的重要营养要素:动物不能断食,更不能断水。啮齿类动物的饮水量不大,一瓶250ml的水对4~8只小鼠,维持三天足足有余。断水的主要原因是水瓶或饮水口漏水,防止断水的关键是选择优质水瓶和灌水后瓶盖的拧紧。打开笼盒。取出水瓶、观察水瓶中剩余水的水质是否混浊,如发现混浊,立即更换水瓶。换上一瓶已清洗过水瓶并经灭菌的饮用水。若剩余水清澈,未发现有污染的情况。则可使用原饮水瓶,在超净台中直接通过龙头灌装超滤酸化水,继续使用。灌装毕,关紧龙头阀门。防止泄漏,腐蚀超淨工作台台面。

 

③更换笼盒:先将灭菌过的笼盒移入超淨工作台中,放入适量灭菌垫料,然后打开需换笼盒的金属网盖,用消毒灭菌过的大镊子(镊头最好套上一段乳胶管),挟住动物尾巴。把动物移至新的笼盒,盖上金属网盖。加足饲料及饮用水,盖上盒盖,扣上紧固扣最后把原笼盒上的动物卡片移插至新的笼盒上。并把换下的笼盒放入专用塑料袋中,扎紧集中外运处理。当然,更换笼盒也可只换笼盒底盒,不换盒盖,这要视笼盒的使用情况而定。更换笼盒时,有时也可顺便检查一下盒盖上的终端过滤器情况,并作适当处理(互相对换,换膜等)。

 

④幼仔斷乳分窩:方法同更換籠盒。

 

⑤动物实验:按上述方法,打开笼盒盖,在超淨工作台内再次对带有乳胶手套的双手用75%浓度的酒精棉球擦试消毒灭菌,从笼盒中取出动物,放在小动物手术台上,麻醉、捆绑四肢、手术、止血、缝合,或灌药、注射、采血,或处死、解剖、取标本等。实验完毕,顺便检查一下动物饲料、饮水及笼盒的污染情况。该添就添,该加则加,该换就换,一切视情况而定。

 

⑥做完超淨工作台中的饲养和实验工作,盖好笼盒,打开超淨工作台的移门,取出笼盒,放在IVC笼架上原位(如需更换位置,则另作别论),对准笼架进出风口,沿笼架搁挡,轻轻推入,接口后在笼架固定钮内放下即可。

 

  ⑦依此操作第二個籠盒或做下一個組合的動物實驗。

 

三、注意事項

 

1、IVC系統安裝的房間必須符合普通級環境標准。

 

2、房間配有功率適當的、能調控溫濕度的空調設備。

 

3、應有換氣裝置和供系統使用的排氣管道。

 

4、配備“萬級”專用超淨台一台及噴霧專用噴槍一把。

 

5、IVC動物實驗室使用的實驗動物,必須來自有生産許可證的實驗動物供應單位,並附有相應級別的合格證書。在引進IVC動物實驗室前,先應檢查核對動物運輸盒上的各種標志(動物品種、品系、規格、數量等),並檢查包裝箱及過濾膜有否破損,確認一切正確無損,方可移至IVC動物實驗室。

 

6、實驗器材及小型儀器進入屏障系統IVC室,按屏障系統物品進入程序規範進行。

 

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